吉他的六根弦是按照三度、四度音程來定弦的。常用的調(diào)弦方法有以下幾種：使用“定音笛”、同度調(diào)弦法、泛音調(diào)弦法、電子校音器。
1、“定音笛”
使用“定音笛”，吉他專用的定音笛各音高與六根空弦的音高是對應關(guān)系，從低到高的音高依次是E、A、D、G、B、E，與吉他六根琴弦是一一對應。也可以使用鋼琴等有固定音高的樂器作為參照。音樂會上往往使用音叉，它振動時國際標準音高A（440Hz），先把第五根弦調(diào)準，然后根據(jù)第五根弦的音高，依次調(diào)準其余各弦。
2、同度調(diào)弦法
同度調(diào)弦法：即同音異弦。調(diào)整第①弦的音高，用音叉確定第①弦的音高為E（Mi）；調(diào)整第②弦的音高，按第②弦第5品位所發(fā)的音高與第①弦空弦的音高E（Mi）相同；調(diào)整第③弦的音高，按第③弦第4品位所發(fā)的音高與第②弦空弦的音高B（Si）相同；調(diào)整第④弦的音高，按第④弦第5品位所發(fā)的音高與第③弦空弦的音高G（Sol）相同；調(diào)整第⑤弦的音高，按第⑤弦第5品位所發(fā)的音高與第④弦空弦的音高D（Re）相同；調(diào)整第⑥弦的音高，按第⑥弦第5品位所發(fā)的音高與第⑤弦空弦的音高A（La）相同；
3、泛音調(diào)弦法
泛音調(diào)弦法：利用空弦和泛音進行校對比較準確，根據(jù)第①弦空弦音E，校對第⑤弦第7品泛音E和第⑥弦第5品泛音E；以第⑤弦第5品泛音A，校對第④弦第7品泛音A；以第④弦5品泛音D，校對第③弦7品泛音D；以第①弦7品泛音B，校對第②弦5品泛音B；泛音調(diào)弦法迅捷、準確。
另外，有時會用到特殊調(diào)弦，由于需要擴大音域或者便于演奏，吉他的調(diào)弦定音會根據(jù)樂曲的特殊要求來確定，常見的是把第⑥弦降低為D。
吉他的六根琴弦，按從下到上分別為e1,b1,d,a,g,e但第6弦也會根據(jù)演奏曲目調(diào)為d，由于吉他聲調(diào)較低一般實際演奏時比在高音譜（G譜）的記錄要高8度,按照市面上吉他定音笛雖然每根弦的基音能快速確定,但演奏時卻可能感到不太和諧，這里推薦兩種種定音方法：1，先用定音笛或音叉（鋼琴等其他定過音的樂器，或信號發(fā)生器等均可）確定某一弦。2，其他各弦按泛音（就是左手指輕按某弦的第5，7，13等品位上，右手撥弦，左手快速離開弦）確定。具體如下：
第6弦第5品——第5弦第7品
第6弦第13品——第1弦，空弦
第5弦第5品——第4弦第7品
第4弦第5品——第3弦第7品 第2弦第5品——第1弦第7品
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